引起食品污染的微生物主要有沙门氏菌、副溶血性弧菌(Bibrio parahemolyticus)、志贺菌(Shigella)、葡萄球菌等。近年来,变形菌属、李斯特菌(Listeria)、大肠菌科、弧菌属(Vibrio)引起的食品污染呈上升趋势:美国1999年沙门氏菌发病1400万例,住院16430人,死亡582人,损失达23亿美元,其中96%的患者由于摄入受污染食物而被感染;1992年印度爆发霍乱弧菌(Vibrio comma)O139中毒事件,波及孟加拉、巴基斯坦等许多国家;1996年5~8月,日本爆发大肠杆菌O157中毒事件,中毒人数过万,死亡11人;1999年在美国、2000年在法国也发生过李斯特菌中毒事件……根据美国食品和药物管理局(FDA)统计,2000~2005年,美国共有470人因饮用生牛奶而感染埃希氏大肠杆菌,总共发生中毒事件18起,涉及16个州。我国食品的细菌性污染现象也非常普遍,其主要是由蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)、副溶血性弧菌和沙门氏菌等微生物引起的食物中毒事件。
ATP生物发光法的基本原理是基于死/活菌的ATP含量差别。活的菌体中ATP含量恒定,而菌体死亡后,由于细胞内酶的作用,菌体中的ATP将迅速被分解,因此可以通过测定待测菌体中ATP的浓度从而计算出活菌数。与传统微生物检测方法相比,ATP生物发光法检测食源性微生物时更简便灵敏、快速高效,并且相关仪器的开发应用也能同时发展起来,例如液闪计数器、照度计等小型化的测试仪器非常便于携带,适合在现场对食品卫生进行检测,可以说是目前检测微生物数目最快捷的方法之一,因此被广泛应用于微生物检验和食品生产环境清洁度的检测。ATP生物发光法的缺点在于其易受到盐分及其他化学物质、游离态等非目标的干扰,若忽略这些干扰因素,必然会使检测结果受到影响,而且此方法不能区分微生物与非微生物ATP。近年来,基于ATP技术原理,许多仪器生产厂家提供了大量解决方案用于商业无菌检测,经较短于传统方法报文后,将食品基质内的ATP进行讲解,释放微生物胞内ATP,并用仪器进行检测后,从而达到商业无菌快速检测,为广大乳品、饮料企业所欢迎的商业无菌快速检测方法。
2.1.1 琼脂平板培养法
细菌性污染是涉及面最广、影响最大、问题最多的一类食品污染,其引起的食物中毒在所有食物中毒中具有普遍性并极具爆发性。细菌性食物中毒全年皆可发生,具有易发性和普遍性等特点,对人类健康有较大的威胁。
1.2 真菌性污染
将待测样品中的微生物富集后,于油镜下直接计数。显微镜镜检法通常与琼脂平板培养法结合使用,通过琼脂平板培养法对菌落进行定性分析,再用显微镜进行定量计数。传统检测方法虽然对设备要求不高,技术含量也偏低,但耗时长,人工消耗量大,一般检测实验室可根据实际情况合理挑选检测方法,无需拘泥于方法选择的形式。
1.3 病毒性污染
□张燕 北京家乐福商业有限公司
2.2.2 ATP生物发光法